Sanger 测序

Sanger 测序（也称为双脱氧序列测定）是一种用于测定 DNA 核苷酸序列的链终止方法。该方法由两届诺贝尔奖得主 Laureate Frederick Sanger 和他的同事在 1977 年开发，是专门用于首次提供人类基因组序列的方法。Sanger 测序法从起始模板合成 DNA 片段，除了在 DNA 中发现的正常核苷酸 (NTP) 之外，通常还使用荧光标记的双脱氧核苷酸 (ddNTP)。双脱氧核苷酸缺乏将 DNA 连接在一起的磷酸二酯键所需的 3-羟基基团 (OH)，因此它们的结合导致链终止。这样，生成了长度不断增加的 DNA 片段，每个片段都由特定的 ddNTP 终止。然后使用荧光鉴定每个片段的终止碱基，并根据片段长度读取序列。

在最近的一项研究中，在阿尔茨海默病 (AD) 小鼠模型中使用体内噬菌体显示来搜索神经血管单元的分子标记，包括内皮细胞和星形胶质细胞。利用 Sanger 测序，发现了一种在不同年龄的 hAPP-J20 小鼠海马中积累的环肽 CDAGRKQKC (DAG)。结缔组织生长因子 (CTGF) 是一种基质细胞蛋白，在 AD 患者和小鼠模型的大脑中高度表达，被确定为 DAG 肽的靶点。在与神经炎症相关的疾病中，DAG 可用作一种工具，用于增强向血管变化和星形胶质增生部位输送治疗剂和显像剂的效果。