HPLC 过滤器中的再生纤维素
高效液相色谱 (HPLC) 是一种通用的化学分析技术，可以根据应用使用多种不同的溶剂。
在样品制备过程中使用过滤去除颗粒有利于 HPLC。要了解有关过滤的更多详细信息，请参阅我们有关 HPLC 样品制备的其他文章。
为什么广泛相容的过滤器非常有用？
有许多不同的过滤器材料适用于各种溶剂，例如酸、碱和有机溶剂。
使用与许多不同溶剂广泛相容的过滤器（例如使用再生纤维素 (RC) 的过滤器）可以使实验室的操作保持一致。通过对多个样品使用相同的过滤器类型，可以消除分析变异的来源。这样可以更容易调查虚假结果的根本原因，并减少决定使用哪种过滤器的时间。通过在多种设备规格中使用相同的标准膜可以拓展标准化想法。这样可确保无论您是过滤流动相还是样品，是使用自动还是手动过滤，系统都将暴露于单一膜类型。
什么是再生纤维素？
再生纤维素由纯纤维素组成，不添加任何润湿剂。溶解和浇注后，它会形成均匀且可重现的滤膜。
该生产工艺可以生产出具有自发润湿特性并与有机试剂和水溶性试剂均相容的亲水膜。RC 膜还具有机械稳定性和良好的湿强度。
RC 如何使 HPLC 样品制备更容易？
再生纤维素过滤器可与许多不同的溶剂广泛相容。这些溶剂包括乙酸、丙酮、乙腈、氯仿、乙醇、乙醚、甲醇、THF 和水。这种广泛的溶剂相容性简化了工作流程。更多信息参见相容性表。
RC 膜的浸提物水平也很低。这些物质会从过滤器中释放出来，可能通过吸收与样品中化合物相同波长的光来影响测量结果（表 1）。降低浸提物水平有助于最大程度地减少对 HPLC 数据的干扰。
表 1. 暴露于常见 HPLC 溶剂中的 RC 过滤器设备中的紫外线吸收材料的水平
| 溶剂 | ||||||
| 产品 | 水 | 甲醇 | 乙腈 | |||
| 214 nm | 254 nm | 214 nm | 254 nm | 214 nm | 254 nm | |
| SPARTAN™ 30 mm, 0.45μm - mAU | 9.5 | 1.4 | 5.7 | 3.7 | 4.5 | 1.9 |
| SPARTAN 30 mm, 0.2 μm - mAU | 2.8 | 2.8 | 4.2 | 3.1 | 5.4 | 1.6 |
| SPARTAN 13 mm, 0.2 μm - mAU | 1.0 | 0.3 | 3.0 | 1.3 | 0.8 | 0.8 |
选择过滤器时考虑的另一个主要方面是过滤器材料的蛋白吸附特性。高水平的非特异性蛋白吸附会大大降低蛋白回收率。这种损失可能会减少可用于分析的蛋白质数量并降低信噪比，从而对实验结果造成不利影响。
RC 过滤器设备显示出低蛋白吸附性（表 2），对定量的影响极小，因此适合用于测定蛋白质水平。对于设计用于制备难以过滤的样品（例如糖浆）的过滤器，由于预计样品回收率会降低，因此无需多加考虑。
表 2. 当过滤牛血清白蛋白 (BSA) 的模型溶液时，低蛋白吸附过滤器显示出高水平的蛋白回收率。
| 过滤器装置 | 1 mg/mL BSA 的回收率 (%) | SD | 样品损失 (μg) | 0.5 mg/mL BSA 的回收率 (%) | SD | 样品损失 (μg) |
| SPARTAN 13 mm, 0.2 μm | 98 | 0.6 | 40 | 97 | 0.3 | 26 |
| SPARTAN 13 mm, 0.45 μm | 99 | 0.7 | 21 | 99 | 0.9 | 9 |
| Whatman GD/X™ 25 mm RC, 0.2 μm | 86 | 1.9 | 284 | 78 | 2.2 | 222 |
| Mini-UniPrep PP, RC, 0.2 μm | 95 | 0.9 | 20 | 94 | 2.5 | 11 |
哪些过滤设备使用 RC 膜？
各种系列的 Whatman 过滤设备均可使用再生纤维素膜。这些设备包括带和不带预过滤器的针筒式过滤器，以及配合自动进样器使用的非针筒式过滤器。SPARTAN 针筒式过滤器系列设备已通过 HPLC 认证。
最近的测试结果表明，在典型的 HPLC 样品制备过程中对膜（例如 RC）进行标准化可减少与样品制备相关的差异，并提高实验室过程的一致性。
试用我们的 Whatman 滤器选择器，看看过滤解决方案是否最适合于您的样品。如需讨论您面临的任何挑战，请联系 Cytiva 科学支持团队。