标签蛋白亲和填料

蛋白标签

添加蛋白标签是指利用基因工程手段将肽序列嫁接到抗体等蛋白上的工艺。从而捕获带标签的重组蛋白用于分析或制备目的。这些标签通常可以用化学试剂或蛋白酶等酶类去除。蛋白标签可以添加到目标蛋白的任何一端。有些标签只适合添加在 C 末端或者 N 末端，而另外一些标签既适合添加在 C 末端也适合添加在 N 末端。将亲和标签添加至蛋白后，即可进行蛋白纯化。常用标签包括麦芽糖结合蛋白 (MBP)、谷胱甘肽 S-转移酶 (GST) 和多组氨酸（his 标签）。您可以通过 his 标签亲和层析或 GST 标签亲和层析来纯化蛋白。

GST 标签和 his 标签

GST 标签对于螯合谷胱甘肽有高亲和力。谷胱甘肽亲和层析是实现一步式蛋白纯化的有效方法，也可以作为多步纯化过程中第一步，具体取决于您对于最终蛋白纯度的要求。Cytiva 提供多种产品用于生产和纯化带 GST 标签的蛋白。

his 标签是一种由六个或更多个组氨酸残基组成的氨基酸基序，可添加到目的蛋白的 N 末端或 C 末端。可利用 his 标签对某些金属的亲和力或使用抗体配基来纯化带 his 标签的蛋白。在适当的缓冲条件下，组氨酸残基段与铜和镍等螯合金属离子结合。在测定方法中使用 his 标签抗体。

标签蛋白纯化

分离过程均采用标准化方案，因此使用蛋白标签可以简化蛋白纯化过程。利用偶联了亲和配基（对标签具有高亲和力）的填料或基质，可以捕获目标重组蛋白。除了散装填料外，我们还提供用于亲和捕获标签蛋白质的预装柱。

螯合金属亲和层析 (IMAC)

带 his 标签的蛋白在一定条件下具有结合某些金属离子的亲和力，因此螯合金属亲和层析是一种常见的带 his 标签蛋白纯化工艺。该技术利用金属离子与填料基质中螯合剂的相互作用，将金属离子固定在填料基质上。his 标签亲和层析通常使用带有镍 (Ni) 或钴 (Co) 离子的填料。

与 his 标签亲和层析相关的常见问题及解答

以下是一些关于 his 标签亲和层析的常见问题及解答。

his 标签的作用是什么？

his 标签可以添加到蛋白中，用于检测或纯化。研究人员和生物制造商利用 his 标签亲和层析选择性地从复杂的混合物中提取目的蛋白。

如何去除 his 标签？

需使用酶切法去除亲和标签。

his 标签是否会影响蛋白的活性？

his 标签的分子量较低，通常不会影响蛋白的结构和功能。但是 his 标签可能会影响某些重组蛋白的稳定性。

我该使用哪一种蛋白标签？

我们的亲和标签选择指南可以帮助您选择最适合您应用需求的标签。

我应该使用哪一种填料来纯化我的重组蛋白？

使用 Cytiva 的 Purify 应用程序选择最适合您的标签蛋白质纯化的亲和层析柱或填料类型。