离子交换填料
用于阴离子交换和阳离子交换层析的层析填料
常见问题
离子交换层析
离子交换层析 (IEX) 基于总离子电荷分离生物分子。使用层析分离技术,您可以分离相似类型的生物分子,因为该技术允许您通过改变缓冲液的 pH 值来控制目标生物分子携带的电荷。IEX 的常见应用有捕获或精纯肽、蛋白、氨基酸和核苷酸,用于分析或制备目的。根据环境 pH 值,蛋白可能携带净负电荷、净正电荷或不携带净电荷。分子不包含净电荷时的 pH 值是其等电点 (pI)。IEX 层析的优点包括:
- IEX 可以在工业层析应用中实现高流速
- IEX 可以浓缩样品
- IEX 提供高收率
- IEX 缓冲液不会使细胞变性
离子交换填料
IEX 填料携带螯合在填料珠上的带电官能团,以吸引携带相反电荷的生物分子。当使用 pH 值大于目的蛋白 pI 的缓冲液时,蛋白携带负电荷,需要携带正电荷的阴离子交换填料。在 pH 值低于目的蛋白 pI 的缓冲液中,蛋白携带净正电荷,因此您需要携带负电荷的阳离子交换填料。
在将特定 pH 值的样品装入 IEX 层析柱后,携带适当电荷的蛋白会与填料结合。
离子交换填料的选择
IEX 填料包含携带正电荷或负电荷的官能团,官能团与琼脂糖、纤维素、聚苯乙烯和聚甲基丙烯酸酯等固体基质共价结合。选择 IEX 填料时,考虑以下因素:
- 您需要阴离子交换剂还是阳离子交换剂
- 您需要强离子交换剂还是弱离子交换剂
- 填料粒径
- 层析流速
- 填料动态结合载量
Cytiva 的离子交换填料以散装或预装柱形式提供。
离子交换层析的类型
阴离子交换层析 (AEX) 使用携带正电荷的 IEX 填料来捕获表面携带净负电荷的分子。阳离子交换层析 (CEX) 使用携带负电荷的 IEX 填料。AEX 和 CEX 层析可以分离多种生物分子,支持用于制备或分析目的。
离子交换填料常见问题解答
以下是关于 IEX 填料的一些常见问题解答。
离子交换的工作原理是什么?
离子交换层析基于与离子交换剂的静电相互作用分离分子和离子。IEX 适用于许多携带电荷的生物分子,包括氨基酸、核苷酸和大蛋白。
离子交换填料由什么材料制成?
与其他液相层析填料一样,IEX 填料可以由各种基架制成,包括纤维素、琼脂糖、葡聚糖和丙烯酰胺。然后将基架耦合至离子交换配基。
如何使用离子交换填料?
使用 IEX 填料分离、捕获或精纯生物分子。
如何为我的应用选择层析填料或离子交换填料?
您可以使用我们的 Purify 网络应用程序,帮助选择适合您需求的填料。