多模式填料

复合模式层析

复合模式层析 (MMC) 或多模式层析可以是在固定相与分析物之间存在一种以上相互作用的层析分离方法。这些技术利用具有功能化配基的介质支持，所述功能化配基同时具有不同的相互作用模式，例如尺寸排阻、亲和、离子交换或疏水相互作用。把这些相互作用组合起来可提高蛋白纯化工艺期间的选择性。使用 Cytiva 的多模式层析手册，以获得常用方法的实用技巧和详细信息。

在亲和层析中，蛋白质上的特异性位点是配基的靶点。然而，复合模式配基没有已知的特异性。MMC 相互作用彼此依存。当使用具有离子和疏水基团的复合模式配基时，盐浓度增加会促进疏水相互作用。离子强度增加会破坏离子键。MMC 可以是物理性的，也可以是化学性的。物理 MMC 具有包含两种或更多种填充材料的固定相，而化学 MMC 仅使用具有两种或更多种功能的单一类型的填充材料。

复合模式介质

复合模式介质结合了各种层析分离方法，减少了纯化所需的层析柱步骤数量。与各分离模式相关的参数可控制洗脱和结合。市售复合模式介质包括：

疏水离子交换填料

这些填料基于具有离子和疏水基团的配基。影响离子交换和洗脱的参数为离子强度、pH 值和缓冲液。影响疏水相互作用的参数为盐类型、浓度和添加剂。Cytiva 的 Capto™ adhere 多模式填料使用具有疏水离子交换或静电活性的多模式配基。

尺寸排阻层析、离子交换和疏水填料

这些多模式填料使用核心微球结构，其孔径仅允许小生物分子穿过珠壳到达核心（其中包含可结合目标分子的配基）。Capto™ Core 700填料是示例之一。基于这些微球的填料旨在通过流穿模式纯化目标生物分子，其中杂质可吸附在填料核心部分的配基上，而目标分子会流过填料并可在流穿模式下捕获。

复合模式填料

介质可在配基的作用下（自身能够产生各种层析相互作用）实现功能化，基于此，复合模式填料具有多种用途。不同蛋白分离模式结合在一起可以提高选择性。这些填料使您只需进行一个层析柱步骤，即可去除工艺杂质，从而节省时间。复合模式层析填料可对目的蛋白进行耐盐吸附。复合模式层析填料无需稀释或添加盐即可促进所需蛋白的结合，使其成为直接捕获步骤的理想选择。您也可以使用这些填料在下游工艺中进行精细纯化。

复合模式填料常见问题解答

以下是有关蛋白复合模式层析填料的一些常见问题解答。

什么是复合模式层析填料？
复合模式填料是含有可同时利用不同层析原理的配基（如离子交换、尺寸排阻和疏水相互作用）的填料。

什么叫复合模式层析柱？
复合模式层析柱是预填充复合模式填料的层析柱。

复合模式层析有哪些益处？
在纯化方案中，复合模式层析可能有利于中度纯化和精纯。这种层析方式可为您提供新的选项（如高电导率结合），以及应对挑战性的纯化工作时提供替代方案。

如果传统填料的效果并不像您所希望的那样有效，复合模式层析通过扩大操作空间，可为您提供纯化工作流程中的替代解决方案。在以下情况下，您可考虑采用复合模式层析：

• 所选常规填料不足以实现所需的目的蛋白纯度时
• 需要耐盐性，例如，当样品的上样电导值对于传统离子交换填料太高时
• 需要减少纯化步骤时。

如何选择适合我的需求的复合模式填料？
我们提供多种形式的多模式填料，可满足用户在蛋白纯化工艺开发和生产的所有阶段的需求。我们的复合模式层析填料是我们 Capto™ 填料产品线的一部分，为支持生产规模的层析而开发。

使用我们的在线填料选择工具，以获得进一步的选择指导。