2-D定量试剂盒用于准确定量将进行电泳分析,如双向电泳、SDS-PAGE或等电聚焦电泳(IEF)的样品蛋白浓度。
- 准确定量蛋白浓度,允许存在的污染物有 2% SDS、1% DTT、8 M 尿素、2 M 硫脲、4% CHAPS、2% 两性电解质载体以及 2% IPG 缓冲液。
- 定量沉淀蛋白,去除干扰物于溶液中。
- 线性反应范围为 0 - 50 μg 蛋白,推荐样品体积为 1 - 50 μl。
普通的分光光度法定量蛋白质依赖于考马斯染料结合或者蛋白催化二价铜 (Cu2+) 离子还原为一价亚铜 (Cu+) 离子。当溶液中除蛋白样品外还有其他溶剂能够与染料结合时则不能使用此方法。这些物质包括两性电解质载体和去污剂,比如 PlusOne CHAPS、SDS 和 Triton X-100。同样,依赖于铜离子还原作用的分析方法不能在还原剂存在的情况下使用,比如 DTT,也不能用来测定存在可与二价铜离子形成复合物的试剂,比如硫脲或乙二胺四乙酸 (EDTA)。
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