表面等离子共振 (SPR) 是一种用于检测分子相互作用的生物物理学技术。该方法可实时高灵敏度地检测分子间相互作用,无需标记。研究人员和生物制造商通常使用 SPR 来研究分子之间的结合动力学和亲和力。

SPR 的工作原理

表面等离子共振(SPR)为纵向电荷密度的振荡,其发生在金属与介电质(dielectric)表面上的物理现象。当一束光以一定角度打到金属表面时,该束光与其激发的表面等离子波发生能量耦合。在某个特定角度下,检测到的反射光强度明显降低至零,该特定角度被称为共振角(SPR角),该角度变化与传感器表面质量成正比。

SPR所使用的芯片是由玻璃镀上的一层薄金膜制成的。在实验中,将其中一个待测量的分子固定在芯片表面,此固定相的分子称作配体ligand,而另一分子以流动的方式流经芯片表面,此流动相的分子称作分析物analyte。该分析物与配体产生相互作用,当分子发生结合和解离时,芯片表面质量变化造成共振角会发生变化,传感图会实时的记录相互作用下的信号值并显示结合动力学与亲和力。

SPR 仪器

SPR 仪器包含光源、芯片、检测器、用于分析的多个实验通道以及SPR数据收集所需的其他组件。不同型号仪器具有不同的样品容量,从用于实验室规模表征的每次分析 15 份样品(Biacore™ X100 系统)到用于筛选或表征研究的每次分析多达 4608 份样品(Biacore™ 8K+ 系统)不等。Biacore™ SPR 仪器可获取亲和力、特异性和动力学实时数据。通过 SPR 仪器软件,自动化 Biacore™ 系统可实现研究或药物开发和质量控制的高效表征和数据分析。

SPR 技术的优势

SPR 检测原理不需要进行任何标记,可以对复杂混合物(如细胞培养上清液或细胞提取物)或者纯化的相互作用物进行检测。在复杂样品中的相互作用物检测,由其中发生互作的分子与“固定”在表面的配体的相互作用特异性确定。SPR 检测原理是非侵入性检测,对透明、有色或不透明样品同样有效。

SPR 技术的优势

SPR 可用于:

  • 蛋白相互作用研究
  • 大小分子药物发现
  • 抗体筛选与精确表征
  • 生产工艺开发与质控

SPR 仪器常见问题解答

以下是有关 SPR 仪器的常见问题:

什么是 SPR 仪器?
SPR 仪器设计用于通过表面等离子共振技术,进行表征和筛选分子相互作用。

如何使用 SPR 仪器?
SPR 仪器可用于研究任何分子类型(从有机化合物到蛋白、核酸、糖蛋白,甚至病毒和全细胞)的相互作用。由于响应值与质量浓度密切相关,因此单位摩尔的响应值与分子量成比例(分子量越小,产生的摩尔响应越低)。