Biacore 传感器芯片 NTA 螯合捕获的原理

NTA 传感芯片由羧甲基化葡聚糖基质与共价固定的氨三乙酸 (NTA) 组成。NTA 分子螯合镍（Ni2+） 等离子，形成与重组蛋白和其他生物分子上的多组氨酸标签结合的配位点。

捕获法相比于共价偶联法的优势

相比于共价偶联，配体的非共价捕获（例如通过金属离子螯合进行捕获）具有许多优势。利用此方法，可以直接从细胞粗提取物或培养基上清中捕获标签蛋白质，几乎不需要样品制备。由于每个循环都捕获新鲜的配体，因此相同的芯片表面可用于分析涉及不同配体的相互作用。再生条件是通用的，因此对实验方法开发的需求降至最低。此外，捕获可以将蛋白定向固定在芯片表面，从而可能暴露最佳的结合位点。

NTA 传感芯片适用于基于片段的药物发现 (FBDD)

在基于片段的药物发现 (FBDD) 等领域，越来越需要能够可靠地检测和分析涉及非常小的化合物的相互作用技术。SPR 仪器灵敏度的提高为在 FBDD 中应用螯合捕获方法铺平了道路。

不同于链霉亲和素捕获方法，当 NTA 传感芯片用于 FBDD 时，使用乙二胺四乙酸 (EDTA)短时间进样即可很容易地从芯片表面去除靶蛋白。这样，实验中靶蛋白会保持新鲜，不会降解。

SGC Karolinska 实验室的研究人员将 NTA 传感芯片用于 PARP1 抑制剂筛选，作为抗癌药物开发 FBDD 项目的一部分，并取得成功。在使用 Biacore T200 进行的实验中，尽管结合的活性位点高度相似，研究小组仍能根据靶蛋白的相互作用特征区分潜在的靶蛋白抑制剂。此外，研究人员发现，传感芯片 NTA 的优势还在于目标蛋白的定向固定可以被控制和统一。

适用于 Biacore 系统的传感芯片规格

Biacore 传感器芯片有两种规格：

• “S 系列”传感芯片适用于 Biacore 8K+、Biacore 8K、Biacore T200、Biacore S200 和 Biacore 4000 系统。
• 非“S 系列”传感芯片适用于 Biacore X100、Biacore 3000 和 Biacore C 系统。