特征

柱床被压缩

• 根据清洁程序清洁层析柱和/或更换过滤器
• 检查样本制备情况。如果样本太粘稠，背压会很高。稀释样本或降低流速
• 重新装填层析柱、装填新层析柱或使用预填充柱

层析柱内出现微生物生长

• 使用推荐的方法清洁层析柱
• 准备并使用预定义的层析柱和系统维护方法。养成将这些方法纳入方法队列中的习惯
• 始终过滤样本和缓冲液。选择低蛋白吸附膜，例如 Whatman 的再生纤维素
• 不用时将其储存在 20% 乙醇中

端件、适配器或管路堵塞

• 清除堵塞物，清洁或更换（可能时）相关部件

出口关闭或泵停止工作

• 确保层析柱出口打开
• 检查泵是否脱落。如果使用蠕动泵，还要检查管路

系统管路内径对于所用流速来说太小

• 更换为内径更大的管路

样本太粘稠

• 用缓冲液稀释样本
• 将蛋白浓度保持在 50 mg/mL 以下
• 使用大多数现代层析系统提供的压力-流量调节功能，降低上样过程中的流速

样本过滤不当

• 清洁层析柱，用低蛋白吸附过滤器（例如用于 ÄKTA™ 层析系统针式过滤器的 Protein Prep）过滤样本，并重复上述步骤

层析过滤器堵塞

• 如果可能，根据清洗程序更换过滤器或用逆流清洗层析柱
• 使用前始终过滤样本和缓冲液。选择低蛋白吸附膜，例如 Whatman 的再生纤维素
• 使用大多数现代层析系统提供的压力-流量调节功能，降低上样过程中的流速

补救措施

层析柱过滤器和/或柱床顶部有蛋白沉淀

• 使用推荐的方法清洁
• 准备并使用预定义的层析柱和系统维护方法
• 如果可能，更换或清洁过滤器或使用新层析柱
• 如果采用了添加剂溶解初始样本，请将添加剂包含在运行缓冲液中

在线过滤器堵塞

• 如果可能，更换或清洁入口过滤器。一些系统在混合器的顶部有一个过滤器

样本混浊

• 延长裂解时间或更改裂解方法
• 添加乙二醇、尿素、去污剂或有机溶剂，以提高样本溶解度。请参考填料或层析柱说明