您是否曾在层析柱的填料柱床上看到气泡?或者填料柱床和适配器之间存在间隙?
这表明层析柱存在问题,不能放心地纯化蛋白。但是无需绝望!这些问题通常很容易解决。
例如,填料柱床中存在气泡,原因很简单,例如层析柱硬件组装不当。而填料柱床和适配器之间存在间隙,可能是因为层析柱填充不当。
Cytiva R&D 蛋白纯化专家总结了这些问题的常见原因及解决方法。
层析柱内有空气
柱床被压缩
可能原因 |
补救措施 |
缓冲液脱气不当 |
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上样或纯化方法构建不当 |
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层析柱硬件组装不当或存在机械损坏 |
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入口过滤器堵塞或部分堵塞 |
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在低温下填充或储存层析柱,然后预热 |
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泵前流路的其他限制 |
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可能原因 |
补救措施 |
背压增加或柱床填充不足 |
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未按说明填充层析柱 |
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流速太高 |
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填料柱床被压缩 |
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层析柱在过高压下运行 |
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压力变化快 |
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