常见问题

  1. 根据RL=Rmax*MWligand/MWanalyte/Sm计算，Rmax设为100-200。
  2. 偶联偏高会使结合速率ka，解离速率kd都测不准.
  1. 浓度梯度的设置在0.1-10KD之间
  2. 常见生物分子间相互作用的亲和力如下范围

  3. 针对于动力学结合趋势，能够达到饱和趋势的浓度设置是我们想要的。但是，针对于某些超高亲和抗体而言，结合段往往想要达到饱和趋势并不容易，因此针对于这类样品，我们不用刻意追去饱和浓度，应更在意图谱规整和QC参数。
  4. 实验结果还需要从图谱和QC来判断。如果图谱正常、QC灯显示合格，结果也是不错的。
  1. 这一类标签明显干扰到检测的可能性很低。
  2. 对此，需要在方法中明确说明样品是否带有标签。此外，阳参样品的验证是最好的说明
  3. 可使用纯的标签蛋白做阴性对照实验。

氨基偶联是通过配体氨基与芯片表面羧基来完成偶联的，配体中含有tris等成分会对氨基偶联产生影响。

解决方案：

  1. 置换buffer，去除Tris等含有伯氨基成分的分子。
  2. 看具体浓度多少，Tris小于50mM时影响不大，可以实验。