常见问题

出现这种情况的影响因素分不同类型，需要逐一排查，首先可以确认必然是参比的信号高了导致的。什么导致它高了？

  1. 最基础的，设置程序或偶联时是否选错通道，尤其捕获法时。
  2. 看流动相样品是否有高折光物质比如甘油、蔗糖、咪唑（置换buffer）。
  3. 看看流动相样品本身存在缓冲体系是不是跟实验用buffer差异大（置换buffer）。
  4. 看看是不是流动相样品粘稠或者浓度太高。
  5. 如果是涉及到有机溶剂那要看有没有做溶剂校正。
  6. 非特异结合（提高盐离子浓度，换buffer，分析物配体对调后实验）。

想查看是否有非特异性结合，请点击分析软件中左侧一列的Bingding to reference，看看是否出现明显的随浓度而增加的信号上升。

  1. 如图所示，很明显，随着浓度的升高，Binding to reference的数值也随之上升，这是非特异结合的表现。
  2. 造成的原因可能是，分析物与通道结合，蛋白聚集等。
  1. 一般建议对活化后再封闭参比通道
  2. 其他降非特异结合的方式，尝试调整buffer条件，pH，盐浓度，去垢剂浓度等
  3. 使用NSB reducer
  4. 偶联伪装配体（例如BSA）

  1. 从图中，我们可以看出，曲线有上万RU的起伏，最大可能是气泡造成的效应
  2. 样品进样前，可以把样品离心一下，Buffer要脱气

分析结果中的图像出现向上漂移现象，原因是什么

关注零浓度情况（Biacore Insight软件关注Blank情况），该图像往往是由于零浓度信号不正常造成的。

  1. 小分子实验：高偶联情况下（CM5>10000RU），在偶联完成后可以放置一段时间平稳后再进行实验
  2. 捕获实验：标签结合情况一般的情况下，会导致配体亲和效果不佳；可选择更优的捕获分子或使用商业化捕获试剂盒，进行配体捕获。
  3. 高亲和实验：高亲和力、慢解离实验中，不适合使用捕获方法，推荐使用直接偶联方法进行实验。
  4. 没有其他问题情况下，建议在设置浓度梯度时，多设置几个零，最终分析结果时，挑选无误的那个零做扣除。