常见问题

  1. 正式偶联前进行pH scouting的实验
  2. 确认蛋白等电点是否为酸性蛋白
  3. 确认蛋白纯度后，可提高配体蛋白进样浓度，延长配体蛋白进样时间
  4. 确认该蛋白是否氨基过少
  5. 是否活化不充分
    • 活化峰在4500-5500RU左右
    • 火花前后的信号差异200RU左右
  6. 芯片改用CM7
  1. 可能活化剂失活
  2. 可能蛋白的精氨酸含量低，转化率低（若是该原因解决办法：可以改成捕获法）

小分子样品高浓度下，样品会有聚集，产生异常高信号

有聚集。偶联浓度不要太高，Running buffer中要有EDTA

该Peak是由于DMSO等有机溶剂的折光导致，药物溶液中有DMSO时，样品和buffer要采用相同浓度的dmso，并对其进行溶剂校正，得到真实结果。

溶液切换时，折光差异变化较大，如图（小分子；CM7；PBS buffer）

  1. 原因：最高浓度的样品稀释的倍数小了，导致buffer 和样品的折光差异大，信号有差异
  2. 调整：最高浓度的样品增加稀释的倍数；提高流速；避免跨通道扣减

建议先查看分析物溶解度，优化分析物溶解度，然后再跑一次，看看是否还是出现这种现象。

如图所示，出现不规则图像如何调整？

  1. 先看是否存在非特异性，binding to reference如下图平稳则无。

  2. 再看buffer是不是有比较特殊的成分存在。