常见问题

G-25:球蛋白分离范围1,000-5,000 Da,排阻极限大约5, 000 Da,因此,可以通过组分分离的方法,将大于5000 Da的蛋白或多肽样品和小于1000 Da的杂质分开。

G-10:常用于将大于700 Da(而小于5, 000 Da)的多肽和小分子杂质(Mr < 100)之间分开。

G-50:用于将大分子蛋白样品(Mr > 30 000)和小分子(Mr < 1500)杂质分开。也常用于将长链核酸和小分子核苷酸分开。对于多糖和DNA,同样需要目的样品分子量大小超过对应的排阻极限。

一般,样品浓度对于脱盐无显著影响,只要样品相对于溶剂的相对粘度不高,并且样品稳定、可溶。常用的水溶性缓冲液中,蛋白浓度在 70 mg/mL 以下,不影响分离,常规推荐低于 30 mg/mL。

如果我们用缓冲液 A 来平衡柱子,上样后,走外水的样品其实是跟着平衡时的缓冲液 A 出峰并溶解在其中的(而非最后赶样品用的洗脱缓冲液)。因此,希望样品溶解在缓冲液 A 中,就用缓冲液 A 来平衡柱子。缓冲液的选择,依据实验需求和填料本身耐受性,同时确保样品在该缓冲液中稳定存在。通常,使用 10-50 mM 磷酸钠缓冲液,至少含有 25 mM NaCl 用于避免离子作用的非特异性吸附,中性 pH 7.0 ~ 7.4。或挥发性缓冲液如 100 mM 乙酸铵或碳酸氢铵。

如有任何专业问题请留下您的联系方式,或通过以下途径与我们联系: