常见问题

多模式层是指利用一种以上相互作用的模式,彼此单独或者协同发挥作用的层析方式。通过至少一种含有多个相互作用位点的配基实现分离。根据实验条件的不同,发挥作用的相互作用种类不同 :包括静电,疏水作用,氢键, π-π 相互作用,亲硫相互作用等。现有的多模式填料包括:

  1. 分子筛与疏水、离子交换模式的复合Capto Core 700多模式层析填料,Capto Core 400,用于传统病毒类疫苗、病毒载体、病毒样颗粒 VLPs、外泌体和质粒等大分子样品或复合物的纯化。
  2. 离子交换与疏水模式的复合:
    • 强阴离子复合模式 Capto adhere 和 Capto adhere ImpRes,常用于内毒素、HCP、核酸等的去除,新应用例如质粒纯化中有效分离 scDNA 和 ocDNA;
    • 弱阳离子复合模式Capto MMC 和Capto MMC ImpRes,常用于抗体的精细纯化。MMC ImpRes 比MMC 粒径小,且配基密度低更易洗脱。

相对于单一作用的层析方法如离子交换,由于多种模式共同作用,多模式填料的结合和洗脱条件摸索更加复杂。多模式填料可以实验跨等电点结合,从而具有特殊的选择性和更宽的操作空间。由于 pI 无法提供很好的结合和洗脱条件参考,条件筛选显得更为重要,可以使用高通量产品如 PreDictor 或 RoboColumn™ 等,借助 DOE 的方法进行摸索,再进行后续验证。

二者均为多模式强阴离子填料,主要区别在于粒径不同,Capto Adhere 为 75 um,和 Capto Adhere ImpRes 为 40 um。大部分抗体 pI 偏碱性,适合阴离子交换走流穿模式。另外, Adhere ImpRes 还可以在结合 / 洗脱模式下进行精纯,特别适合于具有中性或者偏酸性等电点的抗体,同时对片段和异构体的去除也有很好的效果。

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