常见问题
CNBr 与 NHS 预活化填料最主要的区别是 : NHS 预活化填料的反应位点与填料基架之间有 10(HP) 或 14(FF) 个原子的间隔臂,而 CNBr 则没有。对于小分子配基 (< 5 KD),当配基和样品结合的时候,由于 CNBr 没有间隔臂,可能会由于空间位阻而影响结合,在这种情况下,建议使用 NHS 活化配基填料。对于大于 5KD 的配基,二者差异不大。CNBr 较 NHS 产品出现更早,因此经常出现在文献中。一般 NHS 可以替代 CNbr 的应用,建议优先选择 NHS配基。NHS 也有预装柱形式的 HiTrap NHS activated HP。
预活化的填料保存在酸性的环境中,偶联后未被偶联的位点也在碱性条件下被封闭了,这个过程是不可逆的,因此不能剥离再偶联其他蛋白。