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United Kingdom

System Control

常见问题

  1. System Control界面一般有Run DataChromatogramProcess PictureRun Log 等窗格构成,并且可以对每个窗格的布局进行调整,以下为操作方式:

    1)窗格大小:每一个窗格都可以通过拖动边界线来调整;

    2)窗格位置:如图所示,用鼠标左键长按待调整窗格名称如Run Log (此时名称字体会加粗)并向其他窗格方向如Chromatogram拖拽,此时靠近界面中间会出现一个图形窗,将待调整窗格进一步拖拽至图形窗列举的其中一个位置(上、下、左、右、合并)如左侧,并松开左键,即可完成调整。

    图1 System Control界面窗格位置调整

  1. 默认保存位置:手动运行结果,系统默认保存在“用户名”对应的 Home 文件夹的下一级仪器型号子文件里。例如,以用户名 Default 登陆 UNICORN™,该UNICORN™软件下配置有 2 台 ÄKTA 仪器,分别是 Avant 150 和 Avant 25。那么,在 Avant 150设备上手动运行的结果,默认保存在 DefaultHome 文件夹的下一级子文件夹 Avant 150(Manual)中;在 Avant 25 设备上手动运行的结果,默认保存在 DefaultHome 文件夹的下一级子文件夹 Avant 25(Manual)中,如图1所示。

    注意:默认保存,最多只保留 10 个手动运行结果,第 11 个手动运行结果,如果默认保存,就会自动覆盖第 1 个手动运行的结果 Manual run 001,以此类推。

    图 1 手动运行结果的默认保存位置

  2. 另存为:用户可以以“另存为”的方式,自主选择或新建手动运行结果的保存文件夹,并自定义文件名。设置方法:在 System Control 界面,点击 Manual → Execute Manual Instructions,弹出 Manual Instructions 窗格,在 Save Result as → Browse... 按钮,自主选择保存结果的文件夹并自定义文件名,如图 2 所示。

    注意:另存为方式保存的结果,无论累积保存多少结果文件,都不会自动覆盖前面任何的结果文件。

    图 2 手动运行结果的另存为保存方式

安装的每台设备,都有一组默认的参数值,System Settings 中定义的参数值,即为系统的默认参数值。通过 System Control 模块中的 System Settings 对话框,可以在实验运行前,对当前所选设备的系统默认参数值,进行查看和编辑,设置新的默认值。

而在 System Control 模块中的 Manual Instructions 对话框中,手动更改当前运行实验的参数值,则这种改变只影响当前实验的运行。

System Settings 中罗列的一些指令,也可用作方法和手动操作。当实验开始运行,System Settings 中的参数值,即为有效值。若在实验运行时,相同的指令是通过 Method Editor Manual Instructions 手动操作执行的,则新设置的参数值,即为有效值。因此,系统所应用的参数值始终对应着最后一次被操作设置的参数值。当实验运行结束,运行的参数值将重新恢复到 System Settings 状态下的默认值。

打开UNICORN™ 软件的 System Control 窗口,通过点击工具栏中 PauseHold 来控制仪器运行。

Hold:暂停当前方法的继续执行,保持当前阶段的状态,液体仍继续以当前流速和缓冲液比例输送而不停止。

Pause:暂停当前方法的执行并停止所有泵,不再有液体输送。

Hold 命令只在方法运行时才可以使用,手动运行时该命令无法使用。Pause 命令在手动模式或者运行方法时皆可使用。

System Control 整个窗口为灰色状态,首先检查 UNICORN™ 软件和 ÄKTA™ 设备是否正常连接,若连接正常但 Run Data、Chromatogram、Process Picture、Run Log 没有显示,检查方法如下:

  1. 点击 Connect to Systems 图标,确认勾选设备,点选 Control,并点击 OK

    图 1连接系统

  2. 点击 View 下拉菜单,将 Run Data、Chromatogram、Process Picture、Run Log 全部勾选,即显示各窗格信息。

    图 2 窗口显示设置

System state 不是 Ready 状态时,Calibrate... 按钮是灰色的,此时不能进行校准操作。只有当设备状态处于 Ready 时,才可以进行校正操作。

仪器处于运行状态时无法使用导航栏中 System → Settings 进行系统设置更改。如需更改参数设置须系统处于 Ready 状态,如图1所示,在 System Control 界面左下角显示。

图 1 系统处于“Ready”状态

System Control 窗口的 View 下拉菜单把 Process Picture 勾选后,则窗口出现系统流路图,流路图中显示设备中的各个模块和阀门的图标,通过管路连接。点击图标可以设置模块的参数和阀门的状态,一旦设置流速,液体在设备管路中流动,液体流经流路和方向也会在流路图中显示绿色。ÄKTA™ 操作者可以通过流程图来控制系统,根据液体的流向从入口阀到收集器,可以点击图标来设置以下一些功能:

  1. 点击入口阀图标控制入口的管路选择,默认为 A1 B1,直接点击 A1-A7B1-B7 即可更改入口管道。

    图 1缓冲液入口阀入口选择

  2. 点击 A、B 泵图标可以设置流速 System flow,AB 泵的比例 Conc % B(默认为0),和泵洗的入口 Start pump A wash,系统清洗和清洗液排废的出口和体积 Start system wash,其中System out(W) 为从入口管道到层析柱后收集器前出口阀全部清洗,Injection valve(W1) 为从入口管道到层析柱前进样阀全部清洗。

    图 2 系统泵流速选择

  3. 点击进样阀可以设置进样阀的六种状态。默认 Manual load 为 A、B泵吸取液体进入层析柱,常用的模式有两个,Inject 为样品环上样,System pump waste 为 AB泵吸取的液体进入废液管道W1

    图 3 进样阀流路选择

  4. 点击柱位阀图标可设置对应柱位的层析柱连入系统,默认是 By-pass 旁路,液体可以选择正向 Down flow 或反向 Up flow 流入柱子。

    图 4 柱位阀流路选择

  5. 点击UV图标可以设置 UV 归零 Auto zero,设置的 UV 波长吸收数值则立即自动归零。

    图 5 UV归零

  6. 点击 Restrictor 图标可以设置限流器和pH电极的接入情况。默认为 Restrictor 为仅接入限流器,pH only 为仅接入 pH 电极,By-pass both 为两者都不接,Restrictor and pH 为两者同时连入系统。

    图 6 pH阀流路选择

  7. 点击 Outlet valve 可以设置液体的排出选择,默认为 Waste 流入废液管路,Frac 流入收集器废液通道,Out1-10 流入对应的大体积收集瓶。

    图 7 出口阀流路选择

  8. 点击收集器图标可以设置收集器的参数,例如 F9-T双板收集器的常用的设置有:Set Type 为设置放入的收集板类型如96、24、48孔板,0.5 ml板等,First available position 设置开始收集的第一管位置,Fraction Volume 设置每管收集体积,Start 启动收集,Stop 停止收集。

    图 8 收集器设置

冲洗体积和流速都可进行更改(建议使用默认参数),对于ÄKTA™ 25的系统,默认冲洗体积为15 ml(可更改的范围为5-999 ml),默认冲洗流速为20 ml/min (可设置流速范围为0-25 ml/min),对于ÄKTA™ 150系统,默认冲洗体积为80 ml(可更改的范围为5-999 ml),默认冲洗流速为75 ml/min (可设置流速范围为0-150 ml/min)。

更改默认冲洗流速/体积路径:System → Settings… → Advanced → System and pump wash settings → System flow rate/ System pump wash volume

图 1更改系统冲洗默认参数

首先确定仪器配备的是多波长U9-M还是单波长U9-L,U9-L无法更换波长,可以监测280 nm的光吸收值。U9-M可以更换波长,波长可选范围是190-700 nm。具体操作:

如果是手动操作,按以下路径执行:System Control → Manual → Execute Manual Instructions… → Monitors → Wavelength 右侧框中有默认的波长,需要改动的话点击 Off,再在框中输入想要检测的波长即可。

图1. 手动操作中更换监测波长

System Settings 里也可以进行波长设置,System Control → System-Settings… → UV → wavelength → System Settings 里的设置会改变系统的参数,而不是改变本次实验参数。

图2. System Settings中更换监测波长

在手动运行的过程中,我们可以快速进行洗脱梯度的设置。打开 Manual Instructions → Pumps and pressures → Gradient ,更改 Target, Length参数。

图1 手动洗脱梯度设置

System Control → System → Running Methods → Cancel Method,再重新运行 Method Queue 。具体步骤如下图所示(注意此操作会删除整个 Method Queue,无法单独取消某一个 Method)。

图 1删除正在运行的 Method Queue

可以,在 System Control 窗口 Manual → Execute Manual Instructions… 插入需要调整的参数即可。

说明:大部分参数仅针对当前phase,在跳转到下一个phase需要再次确认。(举例:调整流速,只对当前phase有用,跳转到下个phase恢复到原方法中设置的流速)