作者：Hang Yang et al.
发表日期：2018年3月
发表期刊：Frontiers in Microbiology
研究背景
干扰素γ (IFN-γ) 是一种重要的细胞因子，在抗病毒，抗增殖，分化诱导和免疫调节特性中起关键作用。近来，IFN-γ检测被认为是重要的生物标志物，并被用于临床诊断潜伏性结核。鉴于IFN-γ的重要生物学功能和重要的临床检测意义，有必要开发一种准确可行的方法来检测IFN-γ，以研究免疫应答的活力以及诊断潜在疾病。单链可变片段 (scFv) 抗体可通过基因工程轻松地进行操作，以改变其结合行为，并提高亲和力和特异性。重组人IFN-γ蛋白在大肠杆菌中成功表达和纯化，通过间接ELISA监测免疫后小鼠的纯化抗体的效价。筛选抗IFN-γ的scFv抗体，构建重组文库。经过六轮生物淘选，成功分离并鉴定了高亲和力的scFv抗体，并且分离出的scFv对IFN-γ抗原具有特异性。最后，基于该scFv抗体开发了竞争性间接ELISA检测IFN-γ，为有效的IFN-γ免疫测定提供了必要的基础。
实验方法
重组人IFN-γ蛋白在大肠杆菌中成功表达后离心将上清液上样到Ni-NTA柱，一部亲和纯化拿到重组蛋白，通过间接ELISA监测免疫后小鼠的纯化抗体的效价。为了筛选抗IFN-γ的scFv抗体，构建了具有大容量的重组文库。经过六轮生物淘选，成功分离并鉴定了高亲和力的scFv抗体，同样经一步Ni-NTA亲和纯化出的scFv对IFN-γ抗原具有特异性。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 预装柱 | 17524802 | HisTrap HP | 5 × 5 mL |
| 预装柱 | 17371206 | HisTrap excel | 5 × 5 mL |
| 预装柱 | 28953767 | HiTrap TALON crude | 5 × 5 mL |
| 填料 | 17371201 | Ni Sepahrose excel | 25 mL |
| 填料 | 17526801 | Ni Sepahrose HP | 25 mL |
| 空柱 | 28988937 | Column XK 16/20 | 16/ 20 |
