作者：Li N et al.
发表日期：2017年11月
发表期刊：Drug Delivery
研究背景
糖皮质激素 (GCs) 具有很强的消炎和免疫抑制作用，因此被广泛应用于治疗炎症和自身免疫性疾病。甲基泼尼松龙 (MPS) 是治疗急性肺损伤 (ALI) 及其晚期急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 最重要的药物之一，能有效控制早期炎症反应，改善呼吸功能，抑制肺纤维化。
GC激素在体内的分布不具有特异性和选择性，通常需要高剂量GC才能在病变器官中获得满意的治疗效果，因此不可避免地会产生副作用。在治疗肺部疾病和损伤时，减少这些不良副作用是非常重要的。器官靶向给药可减少GC的全身暴露。
可对肺有效靶向的部分是表面活性蛋白A (SP-A)，因为它在II型肺泡上皮细胞中表达最丰富，而在肺外组织或器官中很少表达。在目前的研究中，我们展示了肺靶向MPS负载脂质体的发展及其疗效、特异性和安全性。将两亲性甾体分子装载到功能化的空间稳定单层脂质体 (NSSLs) 中。通过载药后偶联表面活性蛋白A纳米体 (SPANb) 形成脂质体靶向颗粒 (MPS-NSSLs-SPANb)，使脂质体具有靶向功能。在本研究中，我们发现MPS-NSSLs-SPANb具有良好的尺寸分布、形貌和包封效率。MPS-NSSLs-SPANb治疗特异性靶向肺，减少肺炎症，降低肝和肾毒性。与抗体功能化系统相比，纳米体功能化纳米颗粒在动物模型中表现出治疗肺损伤的优越性能。
实验方法
NSSLs制备方法是在形成薄脂膜后，通过聚碳酸酯膜水化和挤压方法制备。为了创建跨膜乙酸钙梯度，进行过夜透析，使用0.9% NaCl替换脂质体培养基中的乙酸钙。
将MPS溶解于0.9% NaCl中，与预制的NSSLs在65-70℃下孵育1h，形成MPS-NSSLs，使用一步Superose 12 10/300 GL凝胶层析柱 (已停产)，以PBS为缓冲液进行纯化，去除未包埋的MPS。
再将表面活性蛋白A (SP-A) 与MPS-NSSLs在4℃下过夜孵育，并使用60:1摩尔比的His-tag和碘乙酸提高偶联效率，得到偶联产物MPS-NSSLs-SPANb。使用一步Superose 12 10/300 GL凝胶层析柱 (已停产)，以PBS为缓冲液进行纯化，去除游离的SP-A。
用上述方法，同样制备SPANb-FITC偶联物，以及将MPS替换成DSPE-PEG-NBD以制备MPS-NSSLs-NBD/NSSLs-NBD。
后续使用偶联的纳米颗粒处理裸鼠，分析其在裸鼠体内分布情况，以及在大鼠体内的药代动力学等。
结果表明，利用SP-A作为肺靶向制剂，克服了SP-A整体抗体分子量大、吞噬肝/脾能力强、免疫原性强等缺陷。用PEG对颗粒进行亲水性修饰，降低了细胞吞噬作用，增加了颗粒的尺寸稳定性。封装效率高达90%，4℃下稳定保存不少于12周。使用FITC-SPANb和MPS-NSSLs-SPANb对比注射后，证实MPS-NSSLs-SPANb具有很高的特异性。药代动力学结果同时表明MPS-NSSLs-SPANb组的MPS浓度在各时间点均高于MPS组。动物实验表明，MPS-NSSLs-SPANb用于肺损伤治疗有效，毒性较小。MPS-NSSLs-SPANb显著降低大鼠BALF中TNF-α、IL-8、TGF-β1表达，以及肺组织中NF-κB表达。MPS-NSSLs-SPANb治疗过程中未见增加感染的机会。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 填料 | 17053601 | Superose 12 pg | 125 mL |
| 空柱 | 28988949 | Column XK 26/40 | 26/40 |
