作者：Pachioni-Vasconcelos J A et al.
发表日期：2020年9月
发表期刊：Soft Materials
研究背景
在本研究中，作者选择L-天冬酰胺酶 (ASNase) 作为治疗性酶类药物的样本。ASNase是一种用于治疗急性淋巴细胞白血病 (ALL) 的重要药物。目前，这种药物主要的副作用是免疫原性和显著的毒性。此外，由于蛋白水解的作用，游离ASNase 从血液中清除的速度相对较快，所以需要，多次给药。
而自组装聚合物囊泡，由于它们具有以下优点，所以被开发用于药物的递送系统中：制备条件的温和性、生物相容性、低免疫原性、延长半衰期和靶向能力。
本研究使用一种天然磷脂囊泡的类似物PEG-PCL，因此它既可以在水核中封装亲水性药物，也可以在脂双层中包装疏水性药物。除此之外，聚合物囊泡具有更高的机械和化学稳定性。在本研究中，作者使用PEG45PCL44、PEG114 的脂质体，用于 ASNase (140 kDa) 以及牛血清白蛋白 (BSA) (70 kDa) 的包装。 并且使用分子筛，对蛋白质的封装效率进行了对比。
实验方法
作者在第一步中，使用薄膜分散法制备脂质膜：将一定质量的 PEG-PCL 共聚物样品置于玻璃容量瓶中并以 0.03% (m/v) 溶解在氯仿中。 有机溶剂会通过旋转蒸发仪挥发在瓶底形成一个薄薄的脂质膜，然后进行真空干燥3 小时以除去痕量的氯仿。随后，用ASNase或 BSA蛋白溶液水合上述的脂质薄膜，然后进一步在 25°C 下进行24h不间断磁力搅拌。使用超声、离心、膜挤压和过滤的工艺来保证脂质体的单分散性。最后，使用Superdex 200 Increase 10/300 GL column对得到的脂质体进行凝胶过滤层析。对其中游离的蛋白质峰进行积分，通过对比原始投入蛋白质的量，作者最终得到了脂质体对蛋白质的包装效率。对于得到的脂质体，作者使用多种检测手段对脂质体进行表征，包括，TEM、DLS等等。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 预装柱 | 28990944 | Superdex 200 Increase 10/300 GL | 1 × 24 mL |
