作者：Lundsten, S et al.
发表日期：2020年4月
发表期刊：Nanomaterials

研究背景

脂质双层盘 (Lipid bilayer disks , lipodisks) 是纳米级双层结构，通过聚乙二醇 (PEG) 连接的脂质，使得脂质体形成一个稳定的扁圆形的结构。这些纳米颗粒在药物递送方面显示出巨大的潜力，并且已经在临床前阶段验证了对抗肿瘤、抗细菌的化合物的递送能力。此外，还可以在脂质体上添加靶向部分以增加递送的特异性。

在过去的几十年间，细胞毒性 (cytotoxic) 化疗药物在癌症的治疗中发挥了重要作用。遗憾的是，化疗药物的疗效往往受到毒性和耐药性的限制。其中，一个著名的肿瘤抑制因子是p53，一种转录因子，它可以对DNA损伤作出反应。几乎所有肿瘤细胞都有一个被抑制的p53通路。基于此，野生型p53的再激活被广泛认为是一种非常有前景的癌症治疗方法。

VIP116及其前体PM2是靶向p53-MDM2/MDM4的装订肽 (stapled peptide)，此外，装订肽的结构可以显著提高在体内的半衰期。

表皮生长因子受体 (EGFR) 在肿瘤细胞中普遍上调，所以已逐渐成为诊断成像和治疗的目标。因此，在本研究中作者开发利用靶向EGFR的脂质盘，用于输送抗癌药物VIP116。并在体外肿瘤细胞模型中，验证了改递送体系的靶向性及有效性。

实验方法

第一步是将DSPE-PEG3400-NHS与EGF偶联，作者使用3.6 mg DSPE-PEG3400-NHS与300 μg鼠EGF在PBS pH 7.4室温过夜搅拌偶联。第二步将EGF偶联的脂质体进行纯化，作者使用分子筛 Sephadex G-150对偶联的PEG脂质微球进行纯化，分离去除未偶联的EGF蛋白。然后，作者使用薄膜分散法制备脂质膜。具体做法是将EGF偶联的脂质溶于乙醚，N2保护减压干燥成脂质膜。再将脂质膜与VIP116在60 ℃水合，完成VIP116的包装。最后，为了将纯化得到的治疗用脂质体用于进一步的体外实验中，作者使用多种检测手段对脂质体进行表征，包括Western、QCM-D等等。体外实验表明脂质体对EGFR有较强的靶向作用，且对VIP116的包装效率较高。

产品信息

Reference
Lundsten, S., Hernández, V. A., et al. (2020). Tumor-Targeted Delivery of the p53-Activating Peptide VIP116 with PEG-Stabilized Lipodisks. Nanomaterials (Basel, Switzerland), 10(4), 783.