在临床试验中，对大量、高纯度和高浓度编码人肝细胞生长因子基因（pUDK-HGF）的质粒的需求增加，用于关键肢体缺血（CLI）的基因治疗。在本文中，我们生产了符合当前良好生产规范

目前，非病毒基因治疗和DNA疫苗接种在治疗和预防遗传性和后天性疾病方面具有巨大潜力。质粒DNA（pDNA）载体的大规模制造，尤其是下游加工，是将非病毒基因治疗推向临床所需的工艺开发的关键方面之一。

近年来，在疫苗应用和基因治疗中对药物级质粒DNA的需求一直在增加。在本研究中，开发了一种由碱性裂解、切向流动过滤、阴离子交换色谱纯化、疏水相互作用色谱和尺寸排阻色谱组成的工艺。

G-四链体(G-quadruplex)是由富含串联重复鸟嘌呤(G)的DNA或RNA折叠形成的高级结构。由于体内具有丰富的G-四链体，这些结构通过与癌基因的启动子区域和DNA链的端粒区域的相互作用而具有生物学相关的作用。

质粒(plasmid) 广泛存在于生物界，从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人类机体中都含有。从分子组成看，有DNA 质粒，也有RNA 质粒; 从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒

pUDK-HGF 是携带人肝细胞生长因子的裸质粒，目前已进入 I 期临床试验，因此需要大量符合药学规格的质粒DNA。文中建立了 pUDK-HGF 中试规模纯化制备的新工艺。