作者:Shuai Shao et al.
发表日期:2020年7月
发表期刊:Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine
研究背景
将晒干的五味子Schisandra chinensis经过均质化破碎细胞、碱孵育和酸中和后,利用离子交换和分子筛两步纯化,能够获得纯度较高、具有抗氧化活性的五味子糖蛋白Schisandra chinensis Glycoprotein,SCGP。将纯化后的SCGP蛋白以不同剂量的方式,注射入小鼠体内,发现SCGP蛋白能够促进乳酸脱氢酶的表达升高,促进肝糖原升高,血尿素含量降低,说明机体能够有更多糖原作为运动能量,并且能够有效清除代谢废物。SCGP在体外也具有清除自由基作用,注射了SCGP的小鼠具有更长的运动时间,表明SCGP具有抗疲劳的药效。
实验方法
将晒干的五味子用纯水进行均质化处理,处理后的样品经1 M NaOH调至pH = 9.5,在35度孵育3小时后离心取上清。上清液经过1 M HCl充分混合调节至等电点将样品沉淀,孵育1 h时后离心取沉淀,沉淀用纯水溶解并用纯水透析。
首先使用DEAE FF离子交换进行初纯,层析柱型为2.6 cm × 30 cm,将透析之后的样品进入层析柱后,用20 mM Tris-HCl,0-1 M NaCl进行线性梯度洗脱,洗脱后的样品在体外进行抗氧化活性的测定,用来鉴定组分。
接着将有抗氧化活性的组分进行Superdex 75凝胶过滤分子筛精纯,分子筛柱型为2.6 × 60 cm,洗脱后的组分用抗氧化活性进行测定。
产品信息
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
---|---|---|---|
预装柱 | 28936541 | HiPrep DEAE FF 16/10 | 1 × 20 mL |
填料 | 17070910 | DEAE Sepharose FF | 25 mL |
空柱 | 28988949 | Column XK 26/40 | 26/40 |
预装柱 | 28989334 | HiLoad 26/600 Superdex 75 pg | 320 mL |
填料 | 17104401 | Superdex 75 pg | 150 mL |