作者:Shuai Shao et al.
发表日期:2020年7月
发表期刊:Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine


研究背景

将晒干的五味子Schisandra chinensis经过均质化破碎细胞、碱孵育和酸中和后,利用离子交换和分子筛两步纯化,能够获得纯度较高、具有抗氧化活性的五味子糖蛋白Schisandra chinensis Glycoprotein,SCGP。将纯化后的SCGP蛋白以不同剂量的方式,注射入小鼠体内,发现SCGP蛋白能够促进乳酸脱氢酶的表达升高,促进肝糖原升高,血尿素含量降低,说明机体能够有更多糖原作为运动能量,并且能够有效清除代谢废物。SCGP在体外也具有清除自由基作用,注射了SCGP的小鼠具有更长的运动时间,表明SCGP具有抗疲劳的药效。

实验方法

将晒干的五味子用纯水进行均质化处理,处理后的样品经1 M NaOH调至pH = 9.5,在35度孵育3小时后离心取上清。上清液经过1 M HCl充分混合调节至等电点将样品沉淀,孵育1 h时后离心取沉淀,沉淀用纯水溶解并用纯水透析。

首先使用DEAE FF离子交换进行初纯,层析柱型为2.6 cm × 30 cm,将透析之后的样品进入层析柱后,用20 mM Tris-HCl,0-1 M NaCl进行线性梯度洗脱,洗脱后的样品在体外进行抗氧化活性的测定,用来鉴定组分。

接着将有抗氧化活性的组分进行Superdex 75凝胶过滤分子筛精纯,分子筛柱型为2.6 × 60 cm,洗脱后的组分用抗氧化活性进行测定。

产品信息

类别 货号 产品名称 规格
预装柱 28936541 HiPrep DEAE FF 16/10 1 × 20 mL
填料 17070910 DEAE Sepharose FF 25 mL
空柱 28988949 Column XK 26/40 26/40
预装柱 28989334 HiLoad 26/600 Superdex 75 pg 320 mL
填料 17104401 Superdex 75 pg 150 mL

Reference
Shao S, Wang MX, Zhang HY, Fan L, Han RX, Shen YX, Yan MM, Zhao DQ. Antifatigue Activity of Glycoprotein from Schisandra chinensis Functions by Reducing Oxidative Stress. Evid Based Complement Alternat Med. 2020 Jul 29;2020:4231340. doi: 10.1155/2020/4231340. PMID: 32802125; PMCID: PMC7411490.