作者：Bao-Hui Cheng et al.
发表日期：2013年12月
发表期刊：Carbohydrate Polymers
研究背景
鱼腥草Houttuynia cordata经过水煮、乙醇沉淀浓缩、蛋白抽提去除后，经过离子交换层析初纯和凝胶过滤分子筛精纯后，得到纯度较高的多糖成分Houttuynia cordata polysaccharide-2 (HCP-2)，后经分析可以得到多糖分子的单糖含量，以及发现该多糖成分具有刺激细胞分泌免疫细胞因子的功能。纯化后的HCP-2多糖通过刺激周边血液单核细胞 peripheral blood mononuclearcells PBMCs，发现PBMCs能够分泌出可观的TNF-α，IL-β等细胞因子。通过和LPS竞争性刺激实验显示HCP-2的受体可能为TLR-4。
实验方法
将1 kg的鱼腥草被粉末化后用3 L纯水煎煮1 h，4000 rpm离心20 min，上清液用4倍体积的乙醇在4度沉淀多糖组分。经过离心，沉淀部分用纯水溶解后，用Sevage reagent法酚氯仿抽提残留的蛋白成分15 min。多次酚氯仿抽提后的上清含有初纯的多糖成分，冻干后约88.2 g。
将40 g的HCP冻干多糖用200 mL的纯水溶解后，用DEAE Sepharose CL-6B column 5.0 cm × 70.0 cm纯化，用0.1， 0.2，0.4 M NaCl分步洗脱，每一次洗脱体积3 L，样品在0.2 M NaCl 洗脱下来。
洗脱的样品接着再用分子筛完成精纯，用纯水当作流动相，层析填料为 Sephacryl S-500 HR。最终得到纯化HCP2样品3 g，分子量约为60 kDa。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 填料 | 17071001 | DEAE Sepharose CL-6B | 500 mL |
| 空柱 | 28988965 | Column XK 50/100 | 50/100 |
| 预装柱 | 28935607 | HiPrep 26/60 Sephacryl S-500 HR | 1 × 320 mL |
| 填料 | 17061310 | Sephacryl S-500 HR | 150 mL |
