作者:Jalal Abdolalizadeh et al.
发表日期:2013年2月
发表期刊:Advanced Pharmaceutical Bulletin
研究背景
肿瘤坏死因子tumor necrosis factor alpha (TNF-α) 作为一种重要的细胞因子,主要有单核细胞和巨噬细胞等免疫细胞分泌,参与炎症发生,细胞增殖和分化,引导细胞凋亡,同时TNF-α用于用于抗肿瘤。利用抗原和抗体的特异性识别和结合,可以利用TNF-α的抗体或者具有抗原表位的抗体片段作为填料配基,能够从细胞裂解液中专一捕获和提取TNF-α。
实验方法
通过噬菌体展示技术phage display technology,获得的具有特异性亲和力的anti-TNF-α scFv单链抗体片段,anti-TNF-α scFv单链抗体片段通过亲和层析填料纯化后,共价偶联到CNBr-activated sepharose 4B填料上,Raji细胞经过LPS刺激后表达TNF-α,将培养后的Raji细胞经过LPS刺激后,用PBS重悬,利用化学裂解液裂解后的上清,通过偶联了anti-TNF-α scFv的填料后,TNF-α将被吸附,清洗杂质后用100 mM Glycine, pH 2.5洗脱,洗脱液随后用2 M Tris,pH 8.0中和,得到纯度较高的TNF-α分子。
产品信息
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
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填料 | 17043001 | CNBr activated Sepharose 4B | 10 g |
空柱 | 28988937 | Column XK 16/20 | 16/20 |