作者：Jalal Abdolalizadeh et al.
发表日期：2013年2月
发表期刊：Advanced Pharmaceutical Bulletin
研究背景
肿瘤坏死因子tumor necrosis factor alpha (TNF-α) 作为一种重要的细胞因子，主要有单核细胞和巨噬细胞等免疫细胞分泌，参与炎症发生，细胞增殖和分化，引导细胞凋亡，同时TNF-α用于用于抗肿瘤。利用抗原和抗体的特异性识别和结合，可以利用TNF-α的抗体或者具有抗原表位的抗体片段作为填料配基，能够从细胞裂解液中专一捕获和提取TNF-α。
实验方法
通过噬菌体展示技术phage display technology，获得的具有特异性亲和力的anti-TNF-α scFv单链抗体片段，anti-TNF-α scFv单链抗体片段通过亲和层析填料纯化后，共价偶联到CNBr-activated sepharose 4B填料上，Raji细胞经过LPS刺激后表达TNF-α，将培养后的Raji细胞经过LPS刺激后，用PBS重悬，利用化学裂解液裂解后的上清，通过偶联了anti-TNF-α scFv的填料后，TNF-α将被吸附，清洗杂质后用100 mM Glycine, pH 2.5洗脱，洗脱液随后用2 M Tris，pH 8.0中和，得到纯度较高的TNF-α分子。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 填料 | 17043001 | CNBr activated Sepharose 4B | 10 g |
| 空柱 | 28988937 | Column XK 16/20 | 16/20 |
