作者：Cong Teng, Peiyou Qin, Zhenxing Shi et al.
发表日期：2020年11月
发表期刊：Food Hydrocolloids
研究背景
食物来源的多糖由单糖和其衍生物构成，具有抗癌、治疗低血糖，抗肥胖，抗氧化等作用，是具有一定药理的功能性食品。藜麦是原产于南美洲的一种粮食作物，已证明富含蛋白质、氨基酸、多酚，类胡萝卜素等抗氧化和增强免疫的功效的分子。本文献通过碱提取配合层析的方法，纯化出具有抗氧化活性的多糖分子。藜麦粉经过过筛、石油醚脱脂，Sevage法抽提蛋白、淀粉酶消化淀粉，之后利用离子交换和凝胶过滤两步层析，将纯化出的具有抗氧化活性多糖命名为SQAP-2。而后利用谱学和电镜的方法测定其单糖和糖苷键的构成，分子量、表面形态等结构性质，又通过体外抗氧化活性实验鉴定出SQAP-2多糖成分具有清除DPPH、ABTS、羟基自由基、超氧化物自由基，以及铁还原的功能，并计算IC50值，为后续的应用前景和产业转化提供研究基础。
实验方法
1、藜麦粉末利用60目筛网完成过筛，然后用石油醚处理6h去清除脂质和色素等小分子化合物，然后在室温下干燥12h。用1.25 M的氢氧化钠加0.05%硼氢化钠的溶液加入预先脱脂的藜麦粉末，比例为1:10 (W/V)，室温下提取3h共两次，提取液最终用1 N 盐酸中和至pH 7.0。中和的样品经4000g离心20min，上清液以1:5 比例加入乙醇，4度沉淀浓缩多糖12h，然后5000g离心15min。沉淀的多糖利用Sevage法加入氯仿正丁醇抽提蛋白。并用α-淀粉酶充分处理样品去除淀粉并透析，最后对碱提取的藜麦多糖进行真空干燥。
2、干燥的多糖用Tris-HCl溶解后，经10000g离心10min，上清用第一步用DEAE Sepharose Fast Flow填料层析纯化，流动相为水，将收集的组分QAP第二步用Sephacryl S-300凝胶过滤层析按照分子量大小进行分离。最终纯化出两个多糖组分SQAP-1和SQAP-2，用SQAP-2用于后续的结构和活性分析。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
|
填料 |
17070910 | DEAE Sepharose Fast Flow | 25 mL |
| 预装柱 | 17119601 | HiPrep 26/60 Sephacryl S-300 HR | 120 mL |
