作者:Yu Jiamin et al.
发表日期:2021年8月
发表期刊:中国畜牧兽医
研究背景
多黏类芽孢杆菌是非致病性革兰氏阳性细菌,能产生芽孢,被广泛应用于微生物制剂的研制。广谱抑菌性多黏类芽孢杆菌抑菌成分多为多糖、多肽、蛋白质等,抑菌机理多为通过作用于目的菌的细胞壁、细胞膜等产 生抑菌作用,具有广泛的抑菌性,安全性较高,所以对产抗菌肽的多黏类芽孢杆菌的研究显得更有意义。本研究在前期抗菌肽发酵工艺优化的基础上,通过制备多黏类芽孢杆菌发酵液,对芽孢杆菌发酵液进行离心、卷式膜超滤、凝胶过滤层析等,以期得到纯度较高的目标产物,并进行抑菌活性及稳定性研究,为抗菌肽的开发利用提供参考。
研究方法
将离心所得的BLCC1-0402上清液,分别选用分子截留量为10、8、5和3 Ku的超滤膜进行超滤,测定不同组分蛋白浓度、总活性、活性回收率、比活和纯化倍数。
用 Superdex Peptide 10/300 GL凝胶层析柱,将超滤离心后收集到 的抑菌效果好的目标产物溶解到超纯水中,0.45 µm滤膜过滤后按500 µL/次上样。流动相为pH = 7.0的PBS, 先用流动相缓冲液平衡层析柱1倍柱体积,流速为 0.5 mL/min,检测波长为214 nm。将样品上样后, 待出现峰时,收集各峰,每管0.6 mL,冷冻干燥。用去离子水稀释成适当浓度进行抑菌试验,以确定目标样品。
产品信息
| 类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| 预装柱 | 29219757 | Superdex 30 Increase 10/300 GL | 1 × 24 mL |