作者：Huifan Liu et al.
发表日期：2018年10月
发表期刊：International Journal of Peptide Research and Therapeutics

研究背景

在之前的一项研究中，从石斛中提取了一种粗肽提取物，这项研究的重点是肽级分（命名为DPP）经DEAE-Sepharose纯化后的表征。高纯度的DPP含有16种游离氨基酸和6种多肽。DPP可以作为AAPH自由基清除剂来保护红细胞氧化应激，肠道消化后衰减明显增加。此外Caco-2细胞模型的结果表明DPP的高吸收和转移速率，其中被动扩散是主要转移途径。通过LC-TOF/MS-MS分析，肽序列Asp-Asp-Asp-Tyr和Asp-Tyr-Asp-Asp对胃环境非常敏感，并被Caco-2细胞完全降解。而Ser-Ser-Arg-Ala-Val-Thr-Phe和Met-Leu-Cys-Ala抵抗胃状况；在随后的肠道消化和Caco-2细胞摄取后序列Met-Leu-Cys-Ala仍能保持其结构。

研究方法

铁皮石斛粗肽进行发酵和提取。

一般来说，选择解淀粉乳杆菌6（5×105-106菌落形成单位/g）在以下条件下发酵10g干茎：接种量，21%；材料与溶剂的比例，1:4（w/v）；发酵时间46h；发酵温度37℃。充分干燥后，将样品在37°C下用200mL超纯水（1:20，w/v）水浴1小时。最后，通过冷冻干燥获得粗肽样品，随后在−20°C下储存直至使用。

将1g粗肽样品溶于100毫升超纯水。然后，将10mL该样品加载到DEAE-Sepharose Fast Flow色谱柱（1.6×35cm），流速为1mL/min，然后用0、0.5和1.5mol/L NaCl溶液洗脱。洗脱液在220nm处分析收集的级分。基于结果，DPP肽级分通过浓缩、透析和冷冻干燥

产品信息

Reference
https://link.springer.com/article/10.1007/s10989-018-9778-6