客户反馈
西泽友弘博士 @东京大学大学院理学研究科生物科学系 Nureki 实验室
“现在，我可以处理更多样本，进而获得更高的通量。以前蛋白质纯化需要一小时，现在只需要 30 分钟
西泽友弘博士经常纯化膜蛋白以用于结晶，我们询问了他对于新型 Superose 6 Increase 体积排阻色谱柱的看法。他表示，与标准的 Superose 6 层析柱相比，新型 Superose 6 Increase 的纯化时间更短、通量更高，这一点令他很满意。
纯化时间曾一度成为我的瓶颈。
使用 Superose 6 层析柱也可以对膜蛋白样本进行分离。但主要的问题是其通量较低。例如，纯化一个样本通常需要一个小时。然后是几个小时的准备工作和清理时间。如此一来便很难在一天之内纯化多个样本。
我们听说，新型 Superdex 200 Increase 的分辨率极高，且流速也有所提升。因此，我们试用了该层析柱，看看它是否可以缩短纯化时间。膜蛋白往往会在去垢剂中形成胶束，从而获得更高的分子量。不幸的是，体积变大反而使靶蛋白被排除在 Superdex 200 Increase 的分离范围之外。靶蛋白的峰非常接近外水体积的峰面积，因此无法进行适当的分离。
现在，纯化时间减半
而 Superose 6 Increase 的分离范围恰好适用于分离我需要的膜蛋白胶束。因此，分离进行得十分顺利。更令我满意的是，使用该新型层析柱时，我可以相应提高流速，从而缩短纯化时间。我惊喜地发现，纯化出一种蛋白质之前需要一个小时，而现在只需要 30 分钟。这为我节省了时间，让我不仅可以在一天内纯化三个或四个不同的样本，而且还可以更快地进行突变体筛选并更快获得结果。”
方法纯化系统：ÄKTAexplorer 10S
纯化环境：4°C
样本：昆虫细胞表达系统产生的膜蛋白
缓冲液：10 mM HEPES，150 mM NaCl，去垢剂
Ciaran McKeown @帝国理工学院医学系
“我们使用 SEC MALS（体积排阻色谱多角光散射）来测定蛋白质和蛋白复合物的绝对分子量。这是一项十分强大的技术，其中的 SEC 部分需要用一个分离效果和分辨率都良好的层析柱进行。我们曾尝试使用该系统自带的层析柱，虽然得出了合理的结果，但其分离范围有限。
我们还尝试了【原有产品】Superose 6 3.2/300，但其流速慢，导致信噪比过高。为了改善分离范围，我们还尝试了硅胶层析柱，但其硅胶构成却也导致了在 pH 范围和缓冲液选择方面有所限制。现在，我们经常使用 Superdex 200 Increase 10/300 和 Superose 6 Increase 来实现此技术。Increase 层析柱具有更好的压力限制、更高的流速，可兼容不同缓冲液，且分辨率良好。但我们确实也遇到了一些问题，例如当出现高达 1 MDa [Mr 1,000,000] 的超大分子复合物，并且我们的样本出现在外水体积中时。在这种情况下，样本可以在空隙中与聚集体和污染物混合，从而产生不纯的样本用于下游分析。”
Andreas Lehmann @ Molecular Partners AG
“我们使用 Superdex 200 Increase 5/150 进行筛查。自从改用新一代 Superdex 以来，我们已经分析了 10,000 多个样本。它速度快、一致性高，帮助我们提高了筛查流程的通量，这一点令我十分满意。”
了解有关 Superdex 200 Increase 的更多信息Ian A Taylor @伦敦弗朗西斯克里克研究所大分子结构实验室
“即使是在两倍流速下，分辨率也优于常规的 Superdex 75 层析柱。随着流速（0.5、0.8 和 1.0 mL/min）的增加，仅观察到峰宽小量增长。总之，新型 [Increase] 10/300 层析柱相对于 Superdex 75 (10/300) 层析柱有显着改进。这意味着完成多角光散射 (MALS) 的时间可以减半，且层析分辨率可以提高。如果使用能够适当管理这些压力的层析系统，则反向压力的增加将不再是大问题。”
了解有关 Superdex 75 Increase 的更多信息Paul Wan 博士 @英国阿斯利康研发中心，发现科学
“分辨率优于标准 Superdex 75 层析柱。增大流速（0.5、0.75、1.5 mL/min）对层析柱的分辨率无影响。当增大流速（0.5、0.75、1.5 mL/min）时，所获得的分辨率几乎没有损失，这让我感到惊讶。而且相比之前，速度也更快”
了解有关 Superdex 75 Increase 的更多信息