凝胶过滤填料

尺寸排阻层析

尺寸排阻层析 (SEC) 或凝胶过滤层析是一种基于分子大小、形状或分子量 (Mr) 分离生物分子的分离技术。您可以使用 SEC 分离蛋白和多糖等大分子复合物。缓冲液成分对分辨率没有直接影响，研究人员和生物制造商可以根据样品类型改变条件。SEC 的两种常见用途为脱盐和分馏。用于纯化蛋白或核酸样品时，脱盐或缓冲液更换需要具有比目标分子更小排阻限度的凝胶。分馏基于凝胶基质中的分子量分离分子。

尺寸排阻层析原理

尺寸排阻层析使用由琼脂糖、聚丙烯酰胺或葡聚糖聚合物磁珠组成的填料。与使用其他层析分离方法的填料不同，尺寸排阻填料不直接结合目标分子。当不同尺寸的颗粒进入基质孔隙或被基质孔隙排除在外时，就会发生生物分子的分离。样品进入尺寸排阻层析柱后，比孔隙大的分子无法通过填料扩散。比孔隙尺寸小的分子则通过层析柱。

SEC 固定相具有特定的分馏范围，这决定了给定基质可以分离的分子量范围。对于小生物分子（例如肽类），可考虑使用具有低分馏范围的尺寸排阻填料。较大的颗粒（例如抗体）需要具有更高分馏范围的固定相。为确保您的纯化工艺具有高分辨率，请考虑：

• 粒径
• 填料微球孔径
• 层析柱尺寸
• 层析柱装填效果
• 系统体积
• 流速

尺寸排阻填料常见问题解答

以下是有关尺寸排阻填料的一些常见问题解答。

尺寸排阻层析的作用是什么？

尺寸排阻层析法通过含有球形珠的填料进行过滤，根据分子大小 分离生物分子。

什么是尺寸排阻填料？

尺寸排阻填料为固定相，有助于根据分子形状或大小和分子量分离生物分子。我们 提供散装和预装柱形式的尺寸排阻填料。

SEC 填料的排阻限度是多少？

排阻限度和分馏范围是尺寸排阻填料的重要参数。填料的排阻限度决定了 可以通过基质孔隙并在外水体积中洗脱的最大分子大小。分馏范围规定了 部分进入颗粒孔隙并可分离的分子量范围。

如何选择尺寸排阻层析填料？

根据您需要的分辨率和收率选择填料。我们提供制备和分析 SEC 所使用的填料。查看我们的 Purify 应用程序，帮助选择尺寸排阻填料或其他层析产品。