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柱层析法

层析法是指:将流动相加载至固定相层析柱上,从而将液体样品中的分子彼此分离。该技术通常基于对层析填料上配基的不同吸附能力来分离化合物。例外情况是尺寸排阻层析法,在这一过程中,分子不与层析柱上的配基相互作用;而是基于尺寸对其进行分离。柱层析法适用于生命科学实验室中的各类分析以及实验室规模的纯化。该方法也可用于生物生产中的工艺开发(分析和纯化)和大规模纯化。

空层析柱 FAQ

以下是一些常见问题解答。

空层析柱是什么?

用于实验室规模的空层析柱是液相层析期间使用的玻璃柱,可将蛋白等分子与其他分子和物质(例如盐)分离。生产级空层析柱也可用于大规模纯化。在手动使用层析柱或与液相层析系统配合使用之前,需要对其进行填充。以受控且一致的方式将首选层析填料(可能是离子交换填料或疏水层析填料)添加至空层析柱中。

柱层析法的基本原理是什么?

在柱层析法中,所加载的样品中的溶质与层析柱内层析填料的配基相互作用。样品上样后,用流动相洗涤层析柱以去除相互作用不强的分子。然后使用另一流动相(洗脱缓冲液)从配基中洗脱剩余分子。

层析柱有哪些应用?

空层析柱在制药和石油工业、环境或生命科学以及毒理学中的应用差异很大。柱层析法在生命科学和生物制药工业中最常见的用途是:

  • 分子纯化,例如抗体的蛋白纯化
  • 旨在测定纯度水平的样品分析
将什么物质填充至层析柱内?

液相层析通常使用小颗粒或填料并将其填充至层析柱中;这也称为固定相。填料基于不同的材料,如琼脂糖或葡聚糖,这些材料经适当制备,具有所需的物理和化学特性。

可使用哪些类型的填料?

基于层析技术,有多种不同填料或介质可用于帮助纯化广泛的目的分子。用于捕获生物分子的常见层析填料类型包括:

层析柱由什么制成?

空层析柱通常由玻璃或不锈钢材料制成。一些快速蛋白液相层析柱由聚丙烯制成。您可选择自行填充层析柱,也可购买即用型预装柱

如何选择空层析柱

使用 Purify 应用程序,有助于您找到适合您应用的 Cytiva 层析柱。