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亲和层析的原理

亲和层析是从复杂混合物中分离蛋白(如单克隆抗体 (mAb) 或抗体片段)的常用技术。它依靠的是目标生物分子与配基或结合伴侣之间的特异性结合相互作用。蛋白质 A 是生物工艺中常用的纯化 mAb 的配基。在亲和层析中,亲和配基通常通过与基质(如琼脂糖或电纺纤维)偶联进行螯合,在层析中作为固定相使用。亲和层析可用于分离研究所需的目标蛋白,也可以作为生物制造多步纯化工艺的一部分。亲和层析也可用于纯化标签重组蛋白

常用的抗体亲和配基

进行亲和层析时,需要了解特定分析物的结合亲和力,以确保成功执行分离方案。蛋白质 A 是一种常用配基,与许多种属的免疫球蛋白质 G (IgG) 具有较强的结合相互作用。蛋白质 G 还可以与多个种属的 IgG 结合,但结合特异性不同于蛋白质 A。蛋白质 L 只能结合含有 κ 轻链的抗体,且通常用于纯化 mAb。2-巯基吡啶对 IgM 具有较高的亲和力。

蛋白质 A 层析柱和抗体亲和力常见问题解答

以下是有关蛋白质 A 层析柱和抗体亲和力产品的一些常见问题解答:

什么是蛋白质 A?

蛋白质 A 是金黄色葡萄球菌细菌的细胞壁表面蛋白,可结合不同种属的免疫球蛋白 (Ig)。

什么是蛋白质 A 层析?

蛋白质 A 层析常用于生物制造。该技术使用蛋白质 A 与基质偶联(例如蛋白质 A 层析柱或填料)来捕获目标抗体。蛋白质 A 有五个免疫球蛋白结合结构域,通常用于研究与制备领域的 mAb 纯化。

什么是蛋白质 A 填料?

蛋白质 A 填料是亲和层析填料,其基质(如琼脂糖)可与蛋白质 A 配基偶联。

蛋白质 A 层析柱的用途是什么?

蛋白质 A 层析柱中预装填了蛋白质 A 填料用于亲和层析。

蛋白质 A 与蛋白质 G 有什么区别?

蛋白质 A 与蛋白质 G 的结构相似,但不同 IgG 亚类和不同种属的 IgG 的亲和力略有不同。两者均可用于亲和层析。我们的 Purify app 可以帮助您选择最适合分子纯化所需的蛋白。

什么是 κ 链和 λ 链?

免疫球蛋白通常由两条重链和两条轻链组成。κ 链和 λ 链是两种类型的 Ig 轻链。Cytiva 提供蛋白质 L 层析填料用于亲和捕获含 κ 轻链的抗原结合抗体片段 (Fab),以及用于亲和捕获人 λ Fab 的产品。