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疏水层析是什么?

疏水层析 (HIC) 是一种制备和分析纯化技术,可基于表面疏水性分离蛋白和单克隆抗体 (mAb) 等生物分子。HIC 利用靶分子与偶联至疏水层析填料的疏水性配基之间的可逆相互作用实现其功能。

HIC vs 反相层析

反相层析 (RPC) 也基于疏水性分离蛋白和肽。然而,RPC 填料的疏水性通常高于 HIC 填料。它们的疏水特性可产生强大的相互作用,需要使用有机非极性溶剂(如乙腈)才能高效洗脱。因为有机溶剂会使大多数蛋白变性,所以 HIC 非常适用于蛋白分离和纯化。RPC 的常见应用是肽纯度检查和图谱分析。

HIC 层析柱 FAQ

以下是关于 HIC 层析柱的一些常见问题解答。

什么是 HIC 层析柱?

HIC 层析柱预填充了 HIC 填料,基于配基与靶分子的疏水性差异从混合物中分离生物分子。HIC 填料中最常见的配基包括丁基、辛基和苯基。

为什么高盐浓度会促进疏水性相互作用?

高盐浓度可增强疏水性相互作用,因为盐会降低样品分子的溶剂化作用,从而暴露其疏水区。实现理想结合所需的盐量与靶分子的疏水性成反比。

HIC 柱层析法如何分离蛋白?

HIC 层析柱基于表面疏水性分离蛋白或其他分子。使用该技术时,在高盐缓冲液条件下将含有各类蛋白(具有疏水区和亲水区)的混合物加载至层析柱。通过此操作,可使靶分子吸附至 HIC 层析柱或填料。

如何使用 HIC 层析柱?

在分析和制备应用的蛋白纯化过程中使用 HIC 层析柱。HIC 工艺可用于捕获、中度纯化和精纯层析。HIC 层析柱还可帮助去除杂质,如生产相关污染物。

哪种 HIC 层析柱适合我的应用?

使用我们的 Purify 应用程序,有助于您找到适合您需求的 HIC 层析柱或填料。