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抗体亲和层析

当存在免疫特异性相互作用时,亲和层析 (AC) 通常是研究需要的首要操作,有时也是唯一操作。不过,可能还需要进一步的精纯操作(通常是分子排阻层析)来获得高度均一的样本。多级纯化在生物制造中很常见。

通过抗体亲和纯化,可获得关于靶分子特性和主要污染物特性的大量信息。这在纯化抗体和抗体片段时提供了巨大的优势。对于靶分子,亲和纯化提供高选择性,通常还提供高结合载量。靶分子被浓缩到更小的体积,这意味着只需一步就能达到高纯度水平(通常超过 95%)。

蛋白 A 常用于抗体层析,尤其是在生物工艺中。其他亲和填料选项包括用于抗体的蛋白 G 和用于抗体片段的蛋白 L

蛋白 A 填料

蛋白 A 层析用于在生物制造过程中捕获重组单克隆抗体 (mAb)。它是一种亲和层析形式,用于纯化来自细胞培养物等生物样本的各种类型的免疫球蛋白 (IgG) 及其片段。这项技术依赖于抗原结合,可让您根据目标蛋白与螯合配基的结合特性来分离和纯化目标蛋白。

为了从样本中纯化抗体,需要使复杂混合物通过层析柱,而层析柱应含有附着在固相载体(通常是层析基质)上的螯合蛋白 A 配基。抗体将有针对性地与蛋白 A 配基形成可逆性结合,从原始培养物中分离和纯化出来。

您可通过我们的蛋白 A 填料充分利用蛋白 A 层析。我们提供预装的蛋白 A 填料,可在抗体生产的下游工序中实现高水平的蛋白分离。使用我们的填料,您可快速从细胞培养物中纯化出多克隆抗体、单克隆抗体和其他重组抗体。

欢迎浏览我们的预装型一次性层析柱和其他方案,解决您的研究、工艺开发和生物制造需求。

蛋白 A 填料:常见问题解答

以下是有关蛋白 A 填料的一些常见问题及解答。

蛋白 A 与什么结合?

蛋白 A 是一种稳定的表面受体,可与来自很多人种和动物种类的免疫球蛋白的 Fc 部分结合。

什么是蛋白 A 层析柱?

蛋白 A 是一种来自金黄色葡萄球菌的细胞壁蛋白,它能与来自不同种属的免疫球蛋白形成可逆性结合。在重组抗体方面,蛋白 A 层析柱可促使从复杂的生物样本(血清、腹水和细胞培养补料)中纯化出抗体。由于蛋白 A 对人 IgG 有较高亲和力,因此蛋白 A 层析柱广泛运用于生物制药生产。

蛋白 G 和 L 填料

除了蛋白 A 填料,您还可使用蛋白 G 填料来进行抗体纯化。每种抗体结合蛋白与不同种属和亚型的抗体结合的能力不同。因此,有必要根据靶抗体的种属和亚型选择与之匹配的抗体蛋白。蛋白 A 和蛋白 G 具有适合哺乳动物 IgG 的 Fc 片段的结合位点。与蛋白 A 填料相比,蛋白 G 可结合更多种真核种属的免疫球蛋白和更多种类的 IgG。蛋白 L 与不同种属的 kappa 轻链结合,用于纯化含 kappa 轻链的抗体片段。