尼龙膜
用于核酸印迹的带电尼龙膜
常见问题
印迹是在生命科学研究以及药物开发和生产中广泛使用的一种核心方法。“印迹”是指将蛋白或核酸转移并固定在固体载体(如膜)上。Western blotting指蛋白质印迹;而 Southern blotting用于 DNA,Northern blotting用于 RNA。无论是哪种分子和印迹类型,均首先通过电泳分离分子(通常在琼脂糖或丙烯酰胺凝胶中),然后将其转移至膜上。分离的分子转移至膜上后,用户可以使用分子特异性探针“标记”目的蛋白或核酸。这一步骤称为杂交。杂交后,可以使用各种成像方法检测和显示复合物。
用于印迹的膜的常见材料为:
- 聚偏二氟乙烯 (PVDF)
- 硝酸纤维素 (NC)
- 尼龙
PVDF 膜
用于蛋白质印迹的 PVDF 膜是一种疏水性固相支持物。这些膜具有不同的孔径以支持不同分子量的蛋白。PVDF 膜需要使用甲醇进行预处理以促进蛋白结合。
硝酸纤维素膜
硝酸纤维素 (NC) 膜用于 Western、Southern 和 Northern 印迹技术。它们具有低背景噪声的优点,但在干燥时会变得脆弱易碎。
尼龙膜
尼龙膜对蛋白和核酸具有较强的结合亲和力和较高的抗张强度。它们以带电荷的形式或中性形式提供。由于其蛋白结合能力较高,尼龙在使用抗体进行检测前需要大面积封闭,以避免产生高背景噪声。因此,不建议在蛋白质印迹中使用由尼龙制成的印迹膜。
使用尼龙膜
带正电荷的尼龙膜或阳离子尼龙膜持久耐用,对蛋白、RNA 和 DNA 具有高结合载量。其机械强度高,具有很高的抗撕裂和抗开裂性。然而,它们也与蛋白质印迹分析中常用的染色剂结合,因此它们更适用于核酸印迹而非蛋白印迹。
尼龙膜常见问题解答
以下是一些关于尼龙膜的常见问题:
什么是尼龙膜?
此类膜是广泛用于结合核酸的支持基质。我们提供 Hybond™ N+ 尼龙膜、电荷适中的 Nytran™ 尼龙膜和带极高正电荷的 Nytran™ SPC 尼龙膜,用于核酸印迹应用。
尼龙膜的电荷是什么?
尼龙膜带正电荷。
为什么需要尼龙膜?
起支撑作用的尼龙膜除具有高抗张强度外,还对核酸具有高结合载量。它们非常适用于需要高灵敏度的应用和/或重新标记应用。